2. Фрагментирование (разделение на фрагменты) молекул ДНК с помощью ферментов - рестриктаз (эндонуклеаз). Существует множество видов рестриктаз, которые разрезают молекулу ДНК в местах, присущих только им, т е. каждый вид рестриктазы только в том месте, в котором ему положено его химической природой.
После такого воздействия на молекулу ДНК образуется множество фрагментов, которые отличаются друг от друга составом, длиной и, соответственно, молекулярным весом.
3. Смесь фрагментов ДНК разделяют методом электрофореза в геле. Метод основывается на том, что под воздействием электрического тока фрагменты ДНК передвигаются в специальной среде - геле. Чем они легче и мельче, тем дальше они уходят от стартовой позиции.
4. Из всего набора фрагментов, расположенных на разных участках электрофоретической пластинки, с помощью специальных зондов выявляют полиморфные фрагменты. Зонды притом обычно маркируют радиоактивными изотопами или нерадиоактивными метками. Что позволяет получить на специальной мембране видимый набор линий разной ширины, соответствующих числу и виду гипервариабельных (ГВ) фрагментов. Расположение отдельных линий варьирует у разных людей, а их совокупность индивидуальна, (рис. 37-7)
Целесообразно производить параллельное исследование известного по происхождению объекта (от А) и неизвестного (от X). Полученные "картинки" распределения ГВ фрагментов сравнивают между собой с использованием методов математического анализа. Рассчитывают возможность случайного совпадения изображений. При очень маленькой вероятности случайного совпадения ею пренебрегают и считают, что сравниваемые объекты идентичны, а следовательно установлена личность человека от которого произошел ранее неизвестный объект X.
Метод позволяет сравнивать между собой результаты исследования неизменных молекул ДНК из ядер клеток крови, спермы и любых других тканей тела человека. "Картинка" расположения ГВ-фрагментов не изменяется на протяжении всей жизни человека, она индивидуальна. Полное сходство "ДНК-узоров" наблюдается только у однояйцевых близнецов. У родственников выявляется сходство генотипических узоров, что позволяет устанавливать родство.
В последнее время разработан и активно внедряется в экспертную практику метод, позволяющий проводить исследование очень малых количеств разрушенных молекул ДНК. Метод основан на том, что перед исследованием ГВ-участков имеющиеся фрагменты ДНК многократно копируются, тем самым наращивается, до необходимого, объем материала, подлежащего исследованию. Этот метод получил название - метод амплификации (реакции цепной полимеризации).
С внедрением в практику этой модификации генотипоскопии было устранено одно из наиболее существенных препятствий на пути практического судебно-медицинского и криминалистического использования метода, заключающееся в ограничениях материала, необходимого для проведения результативного исследования, по объему и качеству.
Использование метода генотипоскопии может позволить решить многие проблемы, возникающие при раскрытии и расследовании преступлений. По данным лаборатории генотипоскопии Экспертнокриминалистического центра МВД России с его помощью возможно следующее.
1. Устанавливать происхождение крови, спермы и некоторых других объектов от конкретного лица. (рис. 37-9)
2. Объединять преступления, если их совершило одно и то же лицо и оставило следы биологического происхождения, например сперму.
3. Определять, не наступила ли беременность от лица, подозреваемого в совершении изнасилования.
4. Устанавливать конкретных участников событий в случаях обнаружения смешанных следов биологического происхождения. (То есть, эксперт при необходимости может сказать, что данное конкретное пятно крови образовано кровью нескольких лиц и указать каких конкретно.)
5. Определять, относятся ли части трупа, обнаруженные отчлененными, к одному или разным телам.
6. Устанавливать, могут ли конкретные мужчина и женщина быть родителями ребенка, (рис. 37-8)
Возможно решение и других, сходных с указанными, вопросов, возникающих при раскрытии и расследовании преступлений.
По результатам исследования "отпечатков" ДНК возможны следующие варианты выводов эксперта.
1. Происхождение исследованного объекта от конкретного лица исключается.
2. Установлена идентичность молекул ДНК в исследуемом объекте и образце, взятом от лица А. Следовательно исследованный объект Х произошел от лица А.
При установлении родителей ребенка возможны несколько вариантов ответа:
1. Исключается происхождение ребенка от одного из предполагаемых родителей.
2. Исключается происхождение ребенка от обоих предполагаемых родителей.
3. Биологическими родителями ребенка являются конкретные мужчина и женщина.
Положительный вывод экспертом делается в случае установления очень маленькой вероятности случайного совпадения полиморфных полос (менее чем 10).
В заключение этого раздела главы приведем несколько примеров использования метода генотипоскопии из практики Экспертно-криминалистического центра МВД России (ЭКЦ МВД РФ).
