| Регулятор роста | Отклик in vitro |
|---|
| V. planifolia | V. andamanica | V. aphylla | V. pilifera |
|---|
| Кин S | Одиночный побег | Одиночный побег | Одиночный побег | Одиночный побег |
| BA | Множественные побеги | Одиночный побег | Множественные побеги (3–4) | Множественные побеги (3–4) |
| NAA | Индукция корней | Индукция корней | Индукция корней | Индукция корней |
| БА + Kin | Одиночный побег | Одиночный побег | Одиночный побег | Одиночный побег |
| Кин + IBA | Одиночный побег | Одиночный побег | Одиночный побег | Одиночный побег |
| БА + ИМК (1.0 + 0.5 мг/л) | Индукция множественных побегов (12–15 шт., в 10-дневной культуре) | Индукция множественных побегов (5–7 в 90-дневной) | Индукция множественных побегов (8–10 в 90-дневной) | Индукция множественных побегов (2–4 в 120-дневной) |
| БА + NAA | Каллусирование и регенерация растений | Множественные побеги | Каллусирование и регенерация растений | Одиночный побег |
| Кин + NAA | Одиночный побег | Одиночный побег | Одиночный побег | Одиночный побег |
| Базальная среда | Удлинение одиночного побега и развитие корней | Удлинение одиночного побега и развитие корней | Удлинение одиночного побега и развитие корней | Удлинение одиночного побега и развитие корней |
БА = бензиладенин, ИМК = индол-3-масляная кислота, Кин = кинетин, НУК = α-нафталинуксусная кислота.
a Ко всем регуляторам роста добавляли базальную среду МС в концентрации от 0,5 до 1,0 мг/л.
РИСУНОК 5.5. Возникновение множественных побегов in vitro у V. aphylla.
Разработаны простые и быстрые протоколы массового размножения V. planifolia (Janarthanam et al., 2005; Kalimuthu et al, 2006). Коммерчески жизнеспособный протокол массового размножения V. tahitensis, другого культивируемого вида ванили, был стандартизован с коэффициентом размножения 1:4,7 в течение периода культивирования 60–70 дней (Mathew et al., 2000). Рао (Rao et al., 2000) сообщил о случае микроразмножении V. wightiana Lindl., находящегося под угрозой исчезновения вида. Изучалось влияние других добавок, а именно, нитрата серебра, тидиазурона, зеатина, кокосового молока и т. д. на размножение побегов in vitro и образование корней у V. planifolia (Giridhar et al., 2001; Giridhar and Ravishankar, 2004).
Превращение кончиков корней в побеги наблюдали у V. planifolia и V. aphylla при культивировании на среде МС с добавлением БА (1,0 мг/л) и ИМК (0,5 мг/л). Эти побеги превратились в проростки, укрепились и укоренились в почве. Ранее сообщалось о превращении корневой меристемы в побеги в культурах ванили in vitro (Philip, Nainar, 1988). Предполагается, что эти меристематические преобразования без стадии каллуса сводят к минимуму вероятность индуцированных эпигенетических изменений. Более ранние исследования (Sreedhar et al., 2007) указали на отсутствие различий в паттернах AFLP-бэндов любого из микроразмножающихся образцов для конкретного праймера, что позволяет предположить отсутствие различий между микроразмножающимися растениями.
РИСУНОК 5.6. Укоренение in vitro в культурах V. planifolia.
<p>Регенерация растений через каллусные культуры</p>
