Биологическая война (Часть 3) полностью

Наиболее благоприятные условия для выращивания бактерии Y. pestis обеспечиваются при свободном доступе кислорода и температуре инкубирования от 26 до 28 °C. При таких условиях Y. pestis уже через 10–12 ч роста образует на плотной питательной среде характерные микроколонии в виде плоских сложных образований с неровными краями, напоминающие кружевные платочки. Примерно к 20–24 ч выращивания у микроколоний формируются выпуклый зернистый желтый, бурый или темно-коричневый центр и плоская тонкая бесцветная, почти прозрачная фестончатая периферическая зона — кружевная каемка (рис. 3.27, А, Б).

^{Рис. 3.27. Макроскопические изображения колоний Y. pestis. А, Б. Микроколонии возбудителя чумы, выращенные на агаре Хоттингера при температуре 26–28 °C. Вирулентный штамм 1300. Макрофотосъемка в падающем свете. Увеличение в 56 раз. На фотографии А микроколонии через 10–12 ч выращивания, на фотографии Б микроколонии через 20–24 ч выращивания. У микроколонии формируется выпуклый желтый, бурый или темно-коричневый центр и тонкая, почти прозрачная фестончатая периферическая зона. В. Двухсуточная колония Y. pestis в проходящем свете (условия выращивания и штамм см. выше). Увеличение в 13 раз. Г. Двухсуточная колония Y. pestis в падающем свете (условия выращивания и штамм см. выше). Увеличение в 13 раз. По А. Г. Золотареву с соавт. (2006)}

К исходу вторых суток вырастают выпуклые, округлые колонии, которые имеют диаметр 2,5–3,0 мм и макроскопически в проходящем свете кажутся серовато-белыми с голубым оттенком, а при падающем свете — беловато-серыми. При микроскопическом исследовании в проходящем свете они хромогенные и нередко напоминают по внешнему виду цветы ромашек или маргариток. Центр у них может быть выпуклым или запавшим, коричневым либо желтым, зернистым или бугристым, тогда как периферическая часть полупрозрачная и кружевная (см. рис. 3.27, В). В падающем свете эти колонии выглядят серо-желтыми и имеют форму полусфер с мелкозернистой поверхностью и ровными или слегка фестончатыми краями (см. рис. 3.27, Г) (Золотарев А. Г. с соавт., 2006).

Морфология колоний чумных бактерий зависит от многих факторов. При удлинении сроков культивирования до 72–96 ч центр колонии уплощается или западает, а периферическая кружевная зона становится плотной либо узкой, а может и вовсе отсутствовать. Поверхность колоний зернистая, а иногда исчерченная (феномен Творта). На морфологию колоний Y. pestis влияют также температура выращивания и состав питательной среды (Золотарев А. Г. с соавт., 2006).

Биохимически возбудитель чумы активен: восстанавливает нитраты в нитриты, ферментирует с образованием кислоты без газа глюкозу, левулезу, мальтозу, галактозу, ксилозу и манит, продуцирует ферменты типа дегидрогеназ и уреаз. Хорошо растет на синтетических средах с аминокислотами (в качестве источников азота) и ферментируемыми углеводами. В витаминах и азотистых основаниях, как правило, не нуждается. Аминокислотные потребности у штаммов из разных природных очагов сильно варьируют. Кроме того, они могут меняться в зависимости от температуры культивирования.

Характерными признаками вирулентных штаммов Y. pestis являются:

наличие капсулы и V- и W-антигенов (антифагоцитарное действие);

способность синтезировать пурины (генерализация инфекции);

образование пигментированных колоний на среде с гемином (генерализация инфекции);

пестициногенность;

неспособность расти на средах при температуре 37 °C в отсутствие ионов кальция;

наличие «рН-6-антигена» (играет роль Fc-рецептора, связывается с IgG человека и приводит к образованию псевдоиммунных комплексов).

Менее ясен ответ на вопрос, какие «факторы вирулентности» нужны Y. pestis для того, чтобы она оказалась способной вызвать вспышку чумы у людей. В этой связи

Н. И. Николаев (1968) и И. В. Домарадский (1998) отмечают, что основное отличие авирулентных штаммов чумного микроба от вирулентных заключается в способности последних размножаться в организме человека. Штаммы, вызывающие вспышки чумы у людей, и штаммы, циркулирующие в природных очагах чумы среди грызунов, по наличию известных факторов вирулентности не отличаются друг от друга. Подробно факторы вирулентности возбудителя чумы описаны в работе А. П. Анисимова (2002).