Проба с кипячением дает надежные результаты, если проводится при рН 5,6. Если моча содержит много фосфатов, то несколько капель уксусной кислоты, которые обычно добавляют при проведении пробы, не понизят достаточно рН и белки останутся в растворенном состоянии в виде алкалальбуминов; в других случаях достаточно нескольких капель уксусной кислоты, чтобы рН упал значительно ниже 5,6, и белки образуют ацидальбумины, не вызывая помутнения. Лучше всего проводить пробу с ацетатным буфером Банга (56,5 мл ледяной уксусной кислоты +118 г ацетата натрия, растворенные в 1 л воды). К 5 мл мочи прибавляют 1–2 мл буфера, в случае наличия даже незначительных количеств белка в моче появляется помутнение. Проба с сульфасалициловой кислотой – одна из самых чувствительных и широко применяемых. К 3–4 мл профильтрованной мочи прибавляют 6–8 капель 20 %-ного раствора сульфасалициловой кислоты. При положительной пробе появляется помутнение. Количественное определение белка. Наиболее распространен метод Брандберга-Робертса-Стольникова, основанный на пробе Геллера, т. е. на появлении белого кольца на границе исследуемой жидкости, содержащей белок, и азотной кислоты. Тонкое, но отчетливо видимое кольцо, появившееся к концу 3-й минуты, говорит о наличии 0,033 г/л белка в исследуемой моче. На 1–2 мл 50 %-ной азотной кислоты осторожно наслаивают профильтрованную мочу. Замечают время после наслаивания при появлении белкового кольца раньше 2 мин. После наслаивания мочу следует развести водой. Подбирают такое разведение мочи, при наслаивании которого кольцо образуется между 2-й и 3-й минутой. Количество белка вычисляют путем умножения 0,033 г/л на степень разведения.
Широкое применение находит определение концентрации белка в моче на основе турбидиметрии. Для этого используется реакция с сульфасалициловой кислотой. Так как степень помутнения пропорциональна концентрации белка, определив экстинкцию (оптическую плотность), можно по заранее построенной кривой высчитать концентрацию белка в данной пробе. В настоящее время все большее распространение получают методы экспресс диагностики (с помощью специальных индикаторных бумажек), особенно ценные при массовых профилактических осмотрах населения. В основу этого метода положен феномен так называемой протеиновой ошибки некоторых кислотно-щелочных индикаторов. Индикаторная часть бумажки пропитана тетрабромфеноловых синим и цитратным буфером. При увлажнении бумажек буфер растворяется и обеспечивает соответствующее рН для реакции индикатора.
Известно, что при рН 3,0–3,5 аминогруппы белков реагируют с индикатором и меняют его первоначальную желтую окраску на зеленовато-синюю, после чего посредством сравнения с цветной шкалой можно ориентировочно оценить концентрацию белка в исследуемой моче. Концентрация белка в моче, выраженная в граммах на 1 л, не дает представления об абсолютном количестве теряемого белка. Поэтому рекомендуется выражать количество белка в граммах за сутки. Для этого необходимо определить его концентрацию в суточном количестве мочи, измерить диурез и вычислить выделение белка за сутки.
Определение уропротеинов Бенс-Джонса. Белки Бенс-Джонса встречаются при миеломной болезни и макроглобулинемии Вальденстрема; это легкие (L) полипептидные цепи, которые благодаря относительно небольшой молекулярной массе проходят неповрежденный почечный фильтр. Их определяют термопреципитацией и электрофоретическим исследованием мочи. Определение глюкозы в моче. Моча здорового человека содержит минимальное количество глюкозы (0,03—0,15 г/л), которое не обнаруживается обычными качественными пробами. Появление сахара в моче (глюкозурия) может быть физиологическим и патологическим. При нормально функционирующих почках глюкозурия наблюдается только в тех случаях, когда увеличивается концентрация сахара в крови (в норме сахара крови 4,6–6,6 ммоль/л, или 0,8–1,2 г/л), т. е. появляется гипергликемия. Так называемый почечный порог глюкозы – концентрация сахара крови, выше которой отмечается глюкозурия, обычно не превышает 9,9 ммоль/л (1,8 г/л). Физиологическая глюкозурия может наблюдаться при введении с пищей большого количества углеводов (алиментарная), после эмоционального напряжения (эмоциональная), приема некоторых лекарств (кофеин, кортикостероидные гормоны). Реже наблюдается почечная (ренальная) глюкозурия, обусловливаемая нарушением резорбции глюкозы в канальцах, когда глюкозурия появляется при нормальной концентрации сахара в крови. Как первичное заболевание ренальная глюкозурия встречается в виде так называемого ренального диабета. Вторичные ренальные глюкозурии могут встречаться при хронических нефритах, невротическом синдроме, гликогеновой болезни. Патологическая глюкозурия чаще всего бывает диабетической (сахарный диабет), реже тиреогенной (тиреотоксикоз), гипофизарной (синдром Иценко-Кушинга), печеночной (цирроз печени).
